撰文
Qi
肌萎缩性脊髓侧索硬化症（ALS）是一种神经退行性疾病，会导致呼吸衰竭和死亡，但目前FDA批准的用于治疗ALS的三种药物疗效均有限，且由于临床前动物模型转化能力有限，药物开发成功率较低。ALS患者来源的诱导多能干细胞（iPSC）衍生的运动神经元（MNs）能克服这些限制进行药物筛选，例如常用于治疗帕金森的盐酸罗匹尼罗在药物筛选分析中被确定为ALS的候选药物，可以改善16个（72.73%）ALSLMNs的多种表型，但该药物在临床试验上是否可行还不得而知。
年6月1日，来自日本庆应义塾大学医学院的HideyukiOkano团队在CellStemCell杂志上发表了一篇题为Ropinirolehydrochlorideforamyotrophiclateralsclerosis:Asingle-center,randomized,double-blind,placebo-controlledphase1/2afeasibilitytrial的文章，他们报告了一项盐酸罗匹尼罗治疗ALS（ROPALS）的单中心、随机、安慰剂对照的1/2a期可行性试验结果，20名患有散发性ALS的参与者在双盲期接受罗匹尼罗或安慰剂24周，以评估盐酸罗匹尼罗的安全性、耐受性和治疗效果。
20名参与者中的13人分配接受盐酸罗匹尼罗，剩余7人接受安慰剂。在双盲期24周完成最后一次给药后，17名参与者进入继续24周的开放标签试验，划分为罗匹尼罗-罗匹尼罗（RR）治疗组和安慰剂-罗匹尼罗（PR）治疗组。就药物安全性而言，所有参与者均报告了不良事件（AEs），但延长罗匹尼罗治疗与较高的嗜睡症和便秘频率有关。在双盲期，治疗组和安慰剂组在反映ALS患者功能状态的指标ALSFRS-R上没有明显区别，组间差异ΔALSFRS-R为1.46，但在开放标签试验中，组间差异持续增加，RR组和PR组的ΔALSFRS-R为9.86，表明RR组功能下降减弱。随后，作者调查了死亡或某些疾病进展事件的发生事件，PR组有7个（%）事件，RR组有13个（54%）事件，RR组的疾病进展下降了2倍，且RR组第一个疾病进展事件的发生时间（即中位无事件生存期，RR组50.3周vsPR组22.4周）延长。此外，在24周和48周结束时，安慰剂组进展到4级ALS严重程度或以上的参与者比例更高。
接下来，作者验证了脑脊液中的神经丝轻链（NfL）作为评估ALS试验标志物的能力。用药后0至24周内，CSF中NfL浓度的差异与ALSFRS-R的下降进程密切相关，且CSF中NfL和过氧化脂质浓度的差异也有很强的相关性，有趣的是，CSF过氧化脂质浓度差异与ALSFRS-R的进展程度相关，表明过氧化脂质可能作为评估疾病进展和药物疗效的临床替代标志物。
罗匹尼罗缓解ALS症状的原因还不清楚，于是作者构建了20名参与者衍生的iPSCs并诱导产生MNs，分析了与细胞生存和功能有关的时间序列ALS表型数据，如MNs的神经元长度和乳酸脱氢酶（LDH）浓度的变化，并对iPSC-MNs进行RNA-seq分析。患者衍生MNs（pMNs）的最大神经元长度明显短于健康对照（hMNs），而用罗匹尼罗治疗可明显改善且能明显降低最大LDH浓度，提示罗匹尼罗可能减少ALS患者的MNs损伤发挥神经保护作用。随后，作者比较了hMNs和pMNs以及有无罗匹尼罗的pMNs。甲羟戊酸脱羧酶（MVD）是唯一一个在患者中表达量明显上调并在罗匹尼罗治疗中下调的基因，此外还有29个参与胆固醇合成的基因在治疗后表达受到抑制，转录因子SREBF2在其中发挥关键作用。通过比较hMNs和pMNs之间的表达，发现TXNRD2（硫氧还蛋白2）在pMNs中明显减少，表明过氧化脂质在pMNs中积累。
为了证实罗匹尼罗的胆固醇合成抑制作用在病人体内的表现，作者检查了病人血液中的脂质部分和脑脊液中过氧化脂质的浓度。结果表明，罗匹尼罗组在开始用药后第0至24周的血脂浓度差异往往低于安慰剂组，但并不显著，检测到过氧化脂质的共14名患者中，9名罗匹尼罗组患者中的8名（89%）和5名安慰剂组患者中的2名（40%）的脑脊液过氧化脂质浓度在24周内下降，表明罗匹尼罗治疗降低了CSF过氧化脂质浓度。最后，作者用法托他汀（一种SREBP2抑制剂）对家族性ALS患者衍生的MNs进行了胆固醇合成抑制实验，结果表明神经元长度得到了明显改善。
总之，这项工作指出罗匹尼罗可能通过在神经元水平上下调胆固醇合成，而非降低全身循环胆固醇以缓解ALS表型，并表明iPSCs及其产物可能作为药物疗效的评价指标或指导病人分层预测治疗反应的生物标志物，但由于此项试验规模较小，需要在更大的队列中进行进一步的验证。
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